自20世纪70年代中期融合标签技术出现以来,亲和标签已成为一种重组蛋白纯化十分有效的工具,具有结合特性高、纯化条件温和、纯化步骤简单、适用性广泛等显著优势。目前为止已出现了种类众多,功能各异、用途多样的亲和标签,极大的促进了重组蛋白的有效纯化。

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His标签-抗His标签抗体

His-tag由人工合成的组氨酸首尾相连构成,通常由6个氨基酸(HHHHHH)组成,也有3个和8个的情况。另外,也存在一种由19个组氨酸构成的天然多聚组氨酸标签(HAT-tag)。His融合标签与其他标签相比有很多明显优势,是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。

Flag标签-抗Flag标签抗体

Flag标签是由八个亲水氨基酸构成的一段寡肽,序列为Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,可用于蛋白纯化及检测。Flag标签可位于蛋白质的C端或N端,该系统已广泛应用于各种细胞类型,包括细菌、酵母和哺乳动物细胞等,相应的Flag标签抗体也被广泛应用。

GST标签-抗GST标签抗体

GST即谷胱甘肽-S-转移酶,具有解毒作用,可将谷胱甘肽中的硫基转移至含硝基或卤化物的复合物中。其天然大小为26KD。近年来,商品化的GST融合蛋白表达体系以及GST标签抗体系统至今仍被广泛应用。近年来在原核表达体系中,谷胱甘肽S转移酶GST表达纯化系统的应用更为普遍。

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