抗体,称为免疫球蛋白,通常是“Y”形,它们是由b细胞分泌的分子。抗体是由两条相同的重链(H)和轻链(L)通过二硫键组装的四肽链结构。每条链具有恒定区(C)和可变区(V)。根据抗体轻链C区氨基酸组成和排列的不同,可将其分为κ和λ两型。抗体的V区又可以细分为CDR(互补决定区)和FR(骨架区)。基于铰链区的大小,链间二硫键的位置和分子量的不同,抗体可以进一步细分为四种亚型。鼠源IgG可以分为IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3。在杂交瘤单抗制备完成后,可以进行抗体亚型鉴定。

服务内容

  • 客户提供:杂交瘤细胞上清;腹水;纯化单抗
  • 鉴定范围:IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3及IgM,IgA,κ,λ
  • 项目周期:1周

亚型鉴定实验流程

抗体亚型鉴定

    ①:酶标板预先包被了针对小鼠IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3及IgM,IgA,κ,λ的特异性抗体;
    ②:将待测样品处理后加入到酶标板中;
    ③:加入荧光标记抗体孵育;
    ④:孵育一段时间后,显色液显色,判断抗体类型。

抗体亚型鉴定意义

不同亚型抗体在抗体结构(例如Fc区结构、是否以多聚体形式存在等)及功能上(例如补体激活、半衰期等)有所区别,进行抗体亚型鉴定能够更加清楚的了解手中抗体的结构及功能,从而更好的应用于下游实验。

IgG抗体亚型间的比较

对比项目 IgG1(γ1) IgG2(γ2) IgG3(γ3) IgG4(γ4)
分子量(kDa) 150 150 170 150
氨基酸隐藏区域 15 12 62 12
H链间二硫键 2 4 11 2
半衰期(天) 14-21 14-21 7 14-21
平均成人血清含量(g/L) 6.98 3.8 0.51 0.56
相对丰度(%) 60 32 4 4

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