酵母蛋白表达

酵母 表达系统是工业微生物中应用较广泛的系统，兼有了原核表达的周期短、成本低廉、易操作等优点，易于工业级别放大培养；同时具备了真核细胞对蛋白的空间折叠，糖基化修饰等能力，使得蛋白可溶性大幅度提高，为研究蛋白的生理活性提供了强有力的工具。
酵母蛋白表达实验影响因素很多，诱导时间、温度、目的基因拷贝数、培养条件以及鉴定方法等。南京铭研生物技术人员具有丰富的经验，能够更大限度发掘酵母菌株的表达潜能，提高表达成功率和表达水平。

服务内容

1. 表达载体：pPICZαA、pPIC9K，pPICZA、 pPIC3.5K，pYE-GAPα
2. 表达菌株：GS115，X33菌株等

服务流程		交付	周期
载体构建	密码子优化 基因合成 亚克隆	基因合成报告 测序验证报告 表达质粒	~3周
质粒准备	质粒抽提 质粒线性化		~3天
阳性克隆筛选	电转 阳性克隆筛选（PCR法）	阳性表达菌株 （PCR鉴定图）	~3周
表达鉴定	表达小试 表达分析鉴定 定株	小试表达报告 WB实验结果	~2周
放大表达纯化	1-2L放大培养 蛋白纯化 蛋白鉴定	发货蛋白 实验报告	~3周

服务特点

1. 自主研发的密码子分析软件，可根据密码子偏爱性，对目的基因进行优化，有效提高蛋白产量和可溶性；
2. 制定灵活的表达载体构建方案，主要采用有利于目的蛋白纯化积累的分泌型表达载体，包括pPIC9、pHIL-S1、pPICZa等；
3. 可依据客户要求提供各种宿主菌株，包括Mut⁺、Mut^s、CS115、KM71、SMD1168等；
4. 确定培养基及诱导条件（菌体密度，甲醇浓度，诱导时间等），提高目标蛋白的表达量；
5. 通过离子交换、透析超滤、凝胶过滤、亲和层析等方法对目的蛋白进行精细的分离纯化；
6. 可根据客户需求提供纯化标签切除，内毒素控制去除等服务。