酵母 表达系统是工业微生物中应用较广泛的系统,兼有了原核表达的周期短、成本低廉、易操作等优点,易于工业级别放大培养;同时具备了真核细胞对蛋白的空间折叠,糖基化修饰等能力,使得蛋白可溶性大幅度提高,为研究蛋白的生理活性提供了强有力的工具。
酵母蛋白表达实验影响因素很多,诱导时间、温度、目的基因拷贝数、培养条件以及鉴定方法等。南京铭研生物技术人员具有丰富的经验,能够更大限度发掘酵母菌株的表达潜能,提高表达成功率和表达水平。

服务内容

  1. 表达载体:pPICZαA、pPIC9K,pPICZA、 pPIC3.5K,pYE-GAPα
  2. 表达菌株:GS115,X33菌株等
服务流程 交付 周期
载体构建
  • 密码子优化
  • 基因合成
  • 亚克隆
  • 基因合成报告
  • 测序验证报告
  • 表达质粒
~3周
质粒准备
  • 质粒抽提
  • 质粒线性化
~3天
阳性克隆筛选
  • 电转
  • 阳性克隆筛选(PCR法)
阳性表达菌株
(PCR鉴定图)
~3周
表达鉴定
  • 表达小试
  • 表达分析鉴定
  • 定株
小试表达报告
WB实验结果
~2周
放大表达纯化
  • 1-2L放大培养
  • 蛋白纯化
  • 蛋白鉴定
发货蛋白
实验报告
~3周

服务特点

  1. 自主研发的密码子分析软件,可根据密码子偏爱性,对目的基因进行优化,有效提高蛋白产量和可溶性;
  2. 制定灵活的表达载体构建方案,主要采用有利于目的蛋白纯化积累的分泌型表达载体,包括pPIC9、pHIL-S1、pPICZa等;
  3. 可依据客户要求提供各种宿主菌株,包括Mut+、Muts、CS115、KM71、SMD1168等;
  4. 确定培养基及诱导条件(菌体密度,甲醇浓度,诱导时间等),提高目标蛋白的表达量;
  5. 通过离子交换、透析超滤、凝胶过滤、亲和层析等方法对目的蛋白进行精细的分离纯化;
  6. 可根据客户需求提供纯化标签切除,内毒素控制去除等服务。