抗体由成熟B淋巴细胞分泌,是一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白,也是机体介导体液免疫的重要效应分子。由于抗体-抗原特异性结合这一独特的生物学特性,使其在蛋白质和小分子检测以及分离应用中扮演着重要的角色。本专题主要介绍与抗体相关的实验技术方法。包括免疫沉淀和免疫共沉淀、蛋白免疫印迹、酶联免疫吸附(ELISA)、免疫细胞化学(ICC)、免疫组织化学(IHC)、GST-pull down以及流式细胞仪、细胞分选等。

免疫沉淀和免疫共沉淀

免疫沉淀是利用抗体抗原特异性结合的原理,从而使抗原(目标蛋白)沉淀下来,达到初步纯化分离的一种技术。

蛋白免疫印迹

蛋白免疫印迹是对目的蛋白进行检测、分析以及定量的一种技术,具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点。

ELISA实验类型及原理

ELISA是一种用酶标记抗原或抗体的方法,常见ELISA实验有四种:直接ELISA、间接ELISA、夹心ELISA和竞争ELISA。

免疫细胞化学(ICC)

免疫细胞化学是利用标记的抗体对细胞内的靶抗原进行定位和定量的一种技术。标记抗体检测抗原的方法有直接法和间接法两种。

免疫组织化学(IHC)

免疫组织化学是基于抗原抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色来对组织内抗原进行定位、定性、定量的一项技术。

GST-pull down

GST pull-down作为体外检测蛋白间直接互做的行之有效的方法,可用于证实已知蛋白之间的互作,也可用于未知蛋白相互作用的初筛。
流式细胞仪是以流式细胞术为核心技术,集光学、电子学、流体力学、细胞化学、生物学、免疫学以及激光和计算机等多门学科和技术于一体的先进科学技术设备。是现代科学研究中的先进仪器之一。流式细胞仪主要由液流系统、光路系统、检测分析系统三部分组成。具有分选功能的流式细胞仪还包括分选系统。

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