抗体库技术是指利用基因工程的方法将全套的抗体重链和轻链的可变区基因克隆到质粒或噬菌体中并表达，然后利用不同抗原筛选出携带特异性抗体基因的克隆，从而获得相应特异性抗体。抗体库技术是在以下两项关键技术的基础上发展起来的，一是PCR技术的发展使人们能通过引物克隆出全套可变区基因，二是人们成功从大肠杆菌中分泌有结合功能的免疫球蛋白分子片段。抗体库技术不仅可以模拟动物免疫系统产生抗体的过程，还拥有诸多独特的优点，在生物和医学研究领域中发挥着重要作用。
按照抗体基因的来源，抗体库可分为4种基本的类型：天然抗体库、抗原倾向性抗体库（免疫抗体库）、半合成抗体库和全合成抗体库。
天然抗体库
抗体基因来源人体或动物外周血淋巴细胞、骨髓、脾细胞及组织，如将非免疫人体的B细胞mRNA反转录为cDNA，以结合于V基因框架区FR1和FR4的寡核苷酸为引物扩增抗体V基因，重链和轻链随机组装为ScFv或Fab，然后直接将这些片段克隆到表达载体进行表达和展示。
应用大容量天然抗体库的主要优点：
- 针对所有抗原。
- 可产生针对自身抗原、非免疫原的抗体。
- 可快速获得抗体。
- 可获得人体抗体。
但天然抗体库也存在较大的局限性，如构建库耗时费力，并且存在大量未知和不可控因素，从而影响库的容量和质量。
抗原倾向性抗体库（免疫抗体库）
抗体基因来源于经过抗原免疫的动物或人的淋巴细胞、组织等。此类抗体库含有丰度较高的抗原特异性抗体，并且有助于筛选到高亲和力的抗体。对于人类基因组计划中发现的一些新基因，可以通过噬菌体或真核载体进行表达，然后免疫动物构建抗体库。而不能对人体直接进行免疫的抗原，可以考虑体外免疫策略，如Andersson等用MUC1核心表位肽先后两次在体外免疫人外周血禁止的淋巴细胞。
抗原倾向性抗体库的主要优点：
- 可从库容较小的文库中筛选到针对免疫抗原的功能性抗体。
- 可作为研究自身免疫性疾病、病毒感染等的良好工具。
- 能筛选到高亲和力抗体。
此类抗体库也存在一些明显的缺点：
- 免疫动物费时。
- 构建抗体库工作量大。
- 由于涉及伦理问题，制备全人源抗体受到限制。
半合成抗体库
半合成抗体库是指由人工合成的一部分可变区序列与另一部分天然序列组合构建而成的抗体库。构建半合成抗体库的主要目的是对抗体进行序列优化。构建此类抗体库主要是利用种系的重链、轻链或重排的可变区片段，其中一个或多个CDR要随机重排。抗体的CDR区可用寡核苷酸直接突变或基于PCR的方法进行部分或完全随机化，包括CDR3序列随机化、CDR3长度随机化、各CDR区全部随机化。用半合成抗体库不经免疫制备抗体对人单抗的研制具有良好的应用前景，尤其针对各种受体因子、受体等难于在体内进行免疫的自身抗原。亲和力高低是用此技术制备抗体的重要因素，一般来说，库容越大越可能得到高亲和力抗体。
全合成抗体库
全合成抗体库是指抗体可变区序列全部由人工合成的抗体库。在合成抗体库中，所有的CDR3库的合成都采用了三联核苷酸突变技术（TRIM），取代了之前的单核苷酸混合法（NNK随机化）。相比NNK法，TRIM法不会出现终止密码子或不想要的氨基酸（只需混合物中不添加相关密码子即可），并且错配只会导致序列长度的改变而不破坏阅读框。
全合成抗体库的主要优点：
- 不需要免疫动物，而且库的内容、位点变异性及库的整体多样性均可以控制。
- 由于不受自身免疫耐受性和克隆选择等因素的影响，可筛选到一些其他库中不易得到的抗体，且对筛选人体抗体也有重要的应用前景。
综上，由生物来源的抗体库包括天然抗体库、抗原倾向性抗体库，完全通过基因合成手段获得的抗体库为全合成抗体库，而由两种途径综合获得的抗体库称为半合成抗体库。每种抗体库都有各自的的优缺点，实验中应该根据具体的需求和实验目的选择合适的类型。铭研生物提供噬菌体展示抗体库的构建与筛选服务，欢迎咨询！